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    大腸菌群MPN法

    時間:2020-11-12      來源:admin      點擊:1762次

    第一法大腸菌群檢驗MPN法
    新老標準異同
    • 結果報告單位不同
    原方法:MPN/ 100g(mL)
    現(xiàn)方法:MPN/ g(mL)
    操作過程請大家仔細閱讀 GB4789.3-2010
    1.MPN法注意事項:
    ?全過程不得超過15min
    ?樣品勻液的pH值應在6.5~7.5之間,
    ?(如接種量需要超過1mL,則用雙料LST肉湯)
    ?48h±2h為最終觀察結果時限。結果也以此時為最終結果
    2.MPN法培養(yǎng)基:LST、BGLB
    (1)月桂基磺酸鹽胰蛋白胨(LST)
    月桂基磺酸鈉能抑制革蘭氏陽性菌的生長,同時比膽鹽的選擇性和穩(wěn)定性好。由于膽鹽與酸產生沉淀,沉淀有時候會使對產氣情況的觀察變得有些困難;
    ?乳糖是大腸菌群可利用發(fā)酵的糖類。有利于大腸菌群的生長繁殖并有助于鑒別大腸菌群和腸道致病菌;
    ?胰蛋白胨提供基本的營養(yǎng)成分;
    ?LST肉湯是國際上通用的培養(yǎng)基,與乳糖膽鹽肉湯的作用和意義相同,但具有更多的優(yōu)越性。
    ?發(fā)酵試驗判定原則:產氣為陽性。
    ?檢測步驟減少(不必分離培養(yǎng)),檢測時間縮短24h
    ?注:如接種量超過1mL,則應用雙料LST肉湯
    (2)煌綠乳糖膽鹽肉湯(BGLB)
    膽鹽可抑制革蘭氏陽性菌
    ?煌綠是抑菌抗腐劑,可增強對革蘭氏陽性菌的抑制作用。
    ?乳糖是大腸菌群可利用發(fā)酵的糖類。有利于大腸菌群的生長繁殖并有助于鑒別大腸菌群和腸道致病菌。
    ?發(fā)酵試驗判定原則:產氣為陽性。由于配方里有膽鹽,膽鹽遇到大腸菌群分解
    ?乳糖所產生的酸形成膽酸沉淀,培養(yǎng)基可由原來的綠色變?yōu)辄S色,同時可看到管底通常有沉淀。
    3.MPN檢索表的應用
    ?MPN(最可能數most probable number)是表示樣品中活菌密度的估測。因此MPN值只是活菌密度的估算值,并不是樣品中活菌數的真值。
    4.使用MPN檢索表的注意點
    ?這個MPN檢索表是ISO、FDA、AOAC、USDA/FSIS、北歐等標準通用的。
    ?表里的數字是有小數點的。
    ?報告單位不同。現(xiàn)報告單位為g/ml,而原報告單位是100g/ml。
    ?原標準MPN表有64個組合,而現(xiàn)標準MPN表只有40個組合。

    當實驗結果在MPN表中無法查找到MPN值時,如:陽性管數為122,123232,233等時,建議增加稀釋度(可做4~5個稀釋度),使樣品的最高稀釋度能達到獲得陰性終點(如果污染程度不能判定,則多加一稀釋度),然后再遵循相關的規(guī)則進行查找,最終確定MPN值。

    文章摘自《食品論壇》

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